Тсн мф 97: ТСН МФ-97 МО скачать бесплатно
- alexxlab
- 0
ТСН 50-303-99 (ТСН МФ-97 МО)
Проектирование, расчет и устройство мелкозаглубленных фундаментов малоэтажных жилых зданий в Московской области
Предлагаем прочесть документ: Проектирование, расчет и устройство мелкозаглубленных фундаментов малоэтажных жилых зданий в Московской области. Если у Вас есть информация, что документ «ТСН 50-303-99 (ТСН МФ-97 МО)» не является актуальным, просим написать об этом в редакцию сайта.
Скрыть дополнительную информацию
Статус документа на 2016: | Актуальный |
---|
Страница 1
Страница 2
Страница 3
Страница 4
Страница 5
Страница 6
Страница 7
Страница 8
Страница 9
Страница 10
Страница 11
Страница 12
Страница 13
Страница 14
Страница 15
Страница 16
Страница 17
Страница 18
Страница 19
Страница 20
Страница 21
Страница 22
Страница 23
Страница 24
Страница 25
Страница 26
Страница 27
Страница 28
Страница 29
Страница 30
Страница 31
Страница 32
Страница 33
Страница 34
Страница 35
Страница 36
Страница 37
Страница 38
Страница 39
Страница 40
Страница 41
Страница 42
Страница 43
Страница 44
Страница 45
Страница 46
Страница 47
Страница 48
Страница 49
Страница 50
Страница 51
Страница 52
Страница 53
Страница 54
Сохраните страницу в соцсетях: |
Другие документы раздела «Московская область»
Статус документа на 2016: | Актуальный |
---|
Фундаменты
Фундамент — несущая опорная часть здания которая воспринимает все нагрузки от наземного сооружения, распределяет по основанию и передает грунту под ним. Устройство фундамента требует также расчета нагрузки, действующей и со стороны грунта. Территория Московской области более чем на 80% сложена пучинистыми грунтами. К ним относятся глины, суглинки, супеси, пески пылеватые и мелкие. При определенной влажности эти грунты, промерзая в зимний период, увеличиваются в объеме, что приводит к подъему слоев грунта в пределах глубины его промерзания. Грунт стремится вытолкнуть фундамент из земли в зимний период и, наоборот, «затягивает» при таянии льда весной.Со временем последствия этих явлений накапливаются, и в результате конструкции зданий деформируются и даже разрушаются. Заложение фундаментов на глубину промерзания не обеспечивает устойчивость легких зданий на пучинистых грунтах, так как такие фундаменты имеют развитую боковую поверхность, по которой действуют большие по значению касательные силы пучения. Поэтому не стоит применять материалоемкие и дорогостоящие фундаменты. Один из путей решения проблемы строительства на пучинистых грунтах малоэтажных зданий — применение мелкозаглубленных фундаментов, закладываемых в сезоннопромерзающем слое грунта. По сравнению с заглубленным фундаментом расход бетона сокращается на 50-80%, а трудозатраты — на 40-70%. Для Подмосковья разработаны «Территориальные строительные нормы ТСН МФ-97 МО» на проектирование, расчет и устройство мелкозаглубленных фундаментов. Согласно этим нормам, подошву фундамента располагают на глубине всего 0,5-0,8 м относительно проектной отметки поверхности (вместо традиционных 1,5-1,7 м).
Основной принцип конструирования мелкозаглубленного фундамента на пучинистых грунтах заключается в том, что ленточный фундамент всех стен здания объединяется в единую систему и образует достаточно жесткую горизонтальную раму, которая перераспределяет неравномерные деформации основания.
При мелкозаглубленном столбчатом фундаменте рама формируется из фундаментных балок, которые жестко соединяются между собой на опорах. Надежным способом устройства фундамента практически для всех видов проблемных грунтов является монолитная плита – обычная или скандинавская. В отдельных случаях специалистами могут быть предложены инженерные решения конструкции фундамента на металлических винтовых сваях либо столбчатого с ростверком.
Конструкция фундамента во многом определяет надежность и долговечность строения. Практически каждый фундамент — уникален. Необходимые геодезические исследования, инженерные расчеты и конструирование фундамента – ответственный этап строительства, предпочтительнее его доверить специалистам.
Домосковье — деревянное домостроение
Фундамент- основа дома. И от того, как правильно он построен зависит долговечность всего дома. Основной вопрос при выборе ленточного железобетонного фундамента — глубина его заложения. Мы предлагаем Вам ознакомиться с выдержками из следующего документа, а потом подвести некоторые итоги.
ТЕРРИТОРИАЛЬНЫЕ СТРОИТЕЛЬНЫЕ НОРМЫ
ПРОЕКТИРОВАНИЕ, РАСЧЕТ И УСТРОЙСТВО МЕЛКОЗАГЛУБЛЕННЫХ ФУНДАМЕНТОВ МАЛОЭТАЖНЫХ ЖИЛЫХ ЗДАНИЙ В МОСКОВСКОЙ ОБЛАСТИ
ТСН МФ-97 МО
МОСКВА 1998 г.
…Территория Московской области более чем на 80% сложена пучинистыми грунтами. К ним относятся глины, суглинки, супеси, пески пылеватые и мелкие. При определенной влажности эти грунты, промерзая в зимний период, увеличиваются в объеме, что приводит к подъему слоев грунта в пределах глубины его промерзания. Находящиеся в таких грунтах фундаменты подвергаются выпучиванию, если действующие на них нагрузки не уравновешивают силы пучения. Поскольку деформации пучения грунта неравномерны, происходит неравномерный подъем фундаментов, который со временем накапливается, в результате чего конструкции зданий претерпевают недопустимые деформации и разрушаются.
Применяемое в практике строительства мероприятие против выпучивания путем заложения фундаментов на глубину промерзания не обеспечивает устойчивость легких зданий, так как такие фундаменты имеют развитую боковую поверхность, по которой действуют большие по значению касательные силы пучения.
Таким образом, повсеместно применяемые материалоемкие и дорогостоящие фундаменты не обеспечивают надежную эксплуатацию малоэтажных зданий, построенных на пучинистых грунтах.
Одним из путей решения проблемы строительства на пучинистых грунтах малоэтажных зданий является применение мелкозаглубленных фундаментов, закладываемых в сезоннопромерзающем слое грунта.
В соответствии с главой СНиП 2.02.01-83* «Основания зданий и сооружений» глубину заложения фундаментов допускается назначать независимо от расчетной глубины промерзания, если «специальными исследованиями и расчетами установлено, что деформации грунтов основания при их промерзании и оттаивании не нарушают эксплуатационную пригодность сооружения».…
Выводы:
-мелкозаглубленный фундамент наиболее подходит для деревянных домов;
— мелкозаглубленный фундамент стоит меньших денег;
-сроки возведения уменьшаются
Морозозащищённый фундамент | ООО НИЦ «Сейсмозащита»
Активно развивающийся рынок малоэтажного строительства требует снижения материальных затрат и экономии трудовых ресурсов. Добиться значительной экономии ресурсов, снизить трудоемкость и сроки строительства помогает применение новых строительных технологий и материалов, которые используются при строительстве различных частей сооружений.
Одним из таких направлений стало использование защиты фундаментов мелкого заложения от негативных воздействий сил морозного пучения грунтов. Ведь известно, что затраты на устройство фундамента составляют значительную долю от общей стоимости здания.
Важно упомянуть, что практически вся территория Приморского края расположена в поясе резко континентального климата, отличительной особенностью которого являются длинные, холодные зимы. Поэтому при возведении малоэтажных зданий строителям постоянно приходится сталкиваться с решением вопросов, обусловленных наличием пучинистых грунтов в основании фундамента. Утепление фундамента мелкого заложения в этом случае является неотъемлемой частью малоэтажного строительства.
В России опыт применения морозозащищенных фундаментов мелкого заложения сдерживался до 1999 года из-за отсутствия качественного отечественного материала на рынке и отсутствия нормативной базы. Российские Территориальные Строительные Нормы ТСН МФ-97 «Проектирование и устройство малозаглубленных фундаментов малоэтажных жилых зданий в Московской области» содержат рекомендацию по применению утеплителей при устройстве фундаментов на пучинистых грунтах с целью уменьшения глубины
промерзания грунта.
Однако, Приморский край более холодный, чем Московская область, да и грунты у нас имеют специфические особенности. Поэтому специалисты НПЦ «Сейсмозащита» провели свои исследования и разработали свою методику расчета и технологию устройства морозозащищенных фундаментов мелкого заложения.
Вследствие того, что теплоизоляционный материал используется ниже отметки земли, в качестве теплоизоляции использовались различные утеплители, представленные на приморском строительном рынке. Опыты показали, что наилучшими характеристиками, которые удовлетворяют необходимым техническим требованиям и выше удельная экономия при строительстве достигается при использовании экструзионного пенополистирола.
Применение данной технологии позволяет сэкономить 40% стоимости фундамента, а также:
- на 15-20% уменьшить теплопотери здания, что сократит расходы на отопление;
- в 2-3 раза продлить срок службы гидроизоляции фундамента;
- увеличить срок службы фундамента;
- защитить здание от деформаций, вызванных силами морозного пучения грунта.
Морозозащищенные фундаменты мелкого заложения (Рис.2) похожи на обычные фундаменты (Рис.1), их отличает только расположение теплоизоляции и глубина заложения. Подошва фундамента расположена на глубине около 30-40 см ниже уровня земли. Фундаменты имеют вертикальную изоляцию, расположенную с внешней стороны от подошвы до отметки выше уровня земли.
При устройстве фундаментов теплоизоляция укладывается вертикально вдоль наружных стен, должна начинаться чуть выше отметки пола и заканчиваться в уровне подошвы фундамента, далее располагаться горизонтально. Чем холоднее климат, тем шире простирается теплоизоляция и тем толще будет ее слой (Рис. 2 и 3 ).
Рассматриваемые эффективные малозаглубленные фундаменты, по сравнению с традиционными заглубленными, позволяют снизить расходы на устройство фундаментов по следующим показателям:
- расход бетона на 50-80%;
- трудозатраты на 40-70%;
- стоимость на 50% и более.
Обычный фундамент
Морозозащищённый фундамент мелкого заложения для отапливаемых зданий
Таким образом, в зависимости от климатических условий района строительства, используя тепловые потоки от эксплуатируемого здания, путем изменения толщины и ширины теплоизоляции можно вывести границу промерзания грунта за пределы подошвы фундамента:
Тепловые потоки здания
В настоящее время НПЦ «Сейсмозащита» имеет все необходимые данные и разработана для применения методика расчета (Пышкин А. Б.) и технология устройства морозозащищенных фундаментов мелкого заложения для малоэтажного строительства на территории Приморского края.
ФУНДАМЕНТЫ
ФУНДАМЕНТ
Фундамент — основание здания и чем оно прочнее, тем долговечнее строение.
Стоимость фундамента составляет около 15-20% от стоимости дома. Исправление неправильно выполненного фундамента трудно выполнимо и затраты на эти работы могут достичь уже 50% от стоимости дома, если самому дому не нанесен значительный ущерб. Поэтому к выбору фундамента нужно подойти очень ответственно.
Перекошенное крыльцо, веранда, плохо открывающиеся двери и окна в деревянных домах, а также трещины в стенах кирпичных домов — все это результат неправильного выбора фундамента.
Главная причина неустойчивости, деформации или разрушения фундамента — действие сил морозного пучения (неравномерного поднятия, «вздутия») некоторых видов грунтов в период зимнего промерзания. Такое поведение грунтов тесно связано с глубиной промерзания грунта в районе строительства и с глубиной подземных грунтовых вод.
Следует иметь ввиду — сила вспучивания настолько велика, что в состоянии приподнять практически любое строение. По данным некоторых исследований эта сила достигает 10-15 т/м2. При площади фундамента всего в 10 м2 сила вспучивания составит 100-150 т. Укротить эти поистине фантастические силы может только грамотное исполнение фундамента.
Итак, прежде чем возводить фундамент, нужно знать:
— на каком грунте будет стоять дом,
— какова глубина промерзания в районе строительства;
— каков уровень грунтовых вод.
_____________________________
ИНФОРМАЦИЯ
Территория Московской области более чем на 80% сложена пучинистыми грунтами. К ним относятся глины, суглинки, супеси, пески пылеватые и мелкие. При определенной влажности эти грунты, промерзая в зимний период, увеличиваются в объеме, что приводит к подъему слоев грунта в пределах глубины его промерзания. Находящиеся в таких грунтах фундаменты подвергаются выпучиванию, если действующие на них нагрузки не уравновешивают силы пучения. Поскольку деформации пучения грунта неравномерны, происходит неравномерный подъем фундаментов, который со временем накапливается, в результате чего конструкции зданий претерпевают недопустимые деформации и разрушаются.
_____________________________
РЕКОМЕНДАЦИИ
Для формирования базового понимания ситуации целесообразно ознакомиться с материалами, представлеными в ссылках СЛЕВА ВВЕРХУ страницы.
Проектирование и строительство малозагубленных фундаментов. / ППУ XXI ВЕК – Напыление ППУ
Активно развивающийся рынок загородного домостроения требует снижения материальных затрат и экономии трудовых ресурсов. Добиться значительной экономии ресурсов, снизить трудоемкость и сроки строительства помогает применение новых строительных технологий и материалов, которые используются при строительстве различных частей сооружений. Одним из таких направлений стало использование теплоизоляционных плит в устройстве фундаментов мелкого заложения.
Прежде чем рассказать о данной технологии, важно упомянуть, что практически вся территория России расположена в поясах резко континентального климат, отличительной особенностью которого являются длинные, холодные зимы и относительно теплое и короткое лето. Поэтому строителям при возведении малоэтажных зданий постоянно приходится сталкиваться с решением вопросов, обусловленных наличием пучинистых грунтов в основании фундамента.
Утепление фундамента мелкого заложения в этом случае является неотъемлемой частью загородного строительства. Российские Территориальные Строительные Нормы ТСН МФ-97 “Проектирование и устройство малозаглубленных фундаментов малоэтажных жилых зданий в Московской области” содержат рекомендацию по применению утеплителей при устройстве фундаментов на пучинистых грунтах с целью уменьшения глубины промерзания грунта.
Вследствие того, что теплоизоляционный материал используется ниже отметки земли, в качестве теплоизоляции рекомендовано применять экструзионный пенополистирол, так как он обладает рядом характеристик, которые удовлетворяют необходимым техническим требованиям.
В России опыт применения морозозащищенных фундаментов мелкого заложения сдерживался до 1999 года из-за отсутствия качественного отечественного материала на рынке и отсутствием нормативной базы. С появлением теплоизоляции ПЕНОПЛЭКС технология устройства морозозащищенных фундаментов мелкого заложения начала активно осваиваться российскими строителями. Данная технология позволяет сэкономить 40% стоимости фундамента, а также:
- На 15-20 % уменьшить теплопотери здания, что сократит расходы на отопление;
- В 2-3 раза продлить срок службы гидроизоляции фундамента;
- Увеличить срок службы фундамента;
- Защитить здание от деформаций, вызванных силами морозного пучения грунта.
Морозозащищенные фундаменты мелкого заложения (Смотрите Рисунок 2) похожи на обычные фундаменты (Смотрите Рисунок 1), их отличает только расположение теплоизоляционных плит и глубина заложения. Подошва фундамента расположена на глубине около 30-40 см ниже уровня земли. Фундаменты имеют вертикальную изоляцию, расположенную с внешней стороны от подошвы до отметки выше уровня земли.
Рисунок 1. Обычный фундамент Рисунок 2 Фундамент мелкого заложения
При устройстве фундаментов в более холодных климатических условиях, “крылья” теплоизоляции должны располагаться горизонтально на уровне подошвы фундамента. Чем холоднее климат, тем шире простирается теплоизоляция и тем тоще будет ее слой (Смотрите Рисунок 3 4 и 5).
Рисунок 3. «Морозозащищенный фундамент мелкого заложения для отапливаемых зданий»:
Рисунок 4 . «Морозозащищенный фундамент мелкого заложения для неотапливаемых зданий»:
Рисунок 5 «Параметры теплоизоляционного слоя»:
Таким образом, в зависимости от климатических условий района строительства, используя тепловые потоки от эксплуатируемого здания, путем изменения толщины и ширины теплоизоляции, можно вывести границу промерзания грунта за пределы подошвы фундамента (Смотрите Рисунок 5).
Рисунок 6 «Тепловые потоки здания»:
Рассматриваемые эффективные малозаглубленные фундаменты, по сравнению с традиционными заглубленными, позволяют снизить расходы на устройство фундаментов по следующим показателям:
Журнал современных строительных технологий “Красная линия”
По-прежнему №1: Коннор Макдэвид возглавляет список 50 лучших игроков НХЛ четвертый год подряд
Коннор МакДэвид остается лучшим игроком НХЛ.
Эдмонтонский суперзвездный центр занял первое место в 20 из 26 бюллетеней ежегодного опроса 50 лучших игроков TSN.
Это четвертый год подряд, когда Макдэвид занимает первое место в общем зачете, что подтверждает его статус самого динамичного игрока НХЛ.
Макдэвид, возможно, является лучшим сочетанием скорости, мастерства и (хоккейного) чутья в истории хоккея.
Он возглавляет лигу по очкам и очкам за игру с сезона 2016-17 и набрал девять очков в четырех играх плей-офф в прошлом сезоне, прежде чем его «Ойлерз» проиграли «Чикаго» в раунде плей-ин.
Единственным человеком в том же полушарии голосования TSN, что и МакДэвид, был центровой из Колорадо Натан Маккиннон, который набрал пять голосов за первое и 19 за второе место в Мак-Маке, финишировав один-два.
Маккиннон отполировал свою репутацию в плей-офф в 2020 году, заработав 25 очков в 15 играх. Он лидирует в НХЛ по очкам плей-офф за игру (1,35) с 2013-14 (минимум 40 игр).
Между тем, самый прославленный игрок сезона 2019-20 — №3.
Центровой «Эдмонтон» Леон Драйзейтл занимает третье место в списке после того, как он занял первое место по результативности в НХЛ, а также проголосовал за Hart Trophy, премию Теда Линдсея и награду «Спортсмен года Германии».
Драйсайтль был единственным игроком, который проголосовал за No.1.
В прошлом году игрок № 3 в рейтинге, правый нападающий «Тампа-Бэй» Никита Кучеров, не включен в список сезона 2020/21, поскольку, по прогнозам, он пропустит регулярный сезон из-за травмы бедра.
Завершают топ-группу этого года центровой из Торонто Остон Мэтьюз, четвертый по счету, который успел забить 50 мячей еще до дисквалификации регулярного сезона 2019-20, и Виктор Хедман, победивший защитник Тампа-Бэй, занял 5-е место. Кубок Стэнли 2020 года и Трофей Конна Смита в качестве MVP плей-офф.
Сидни Кросби, который занимал первое место в первые семь лет опроса и второе место в следующие три года, занял 7-е место, его самый низкий результат за 11-летнюю историю опроса.
Самым большим прыжком в десятку лучших стал центровой «Баффало» Джек Эйхел, который поднялся с 29-го места в сезоне 2019-20 на 8-е место в 2020-2021 годах, т.е.
Вратарь «Виннипега» Коннор Хеллебайк возвращается в топ-50 после годичного отсутствия и занимает 15-е место среди лучших вратарей.
Среди первых 50-х защитники Колорадо Кейл Макар (No.22) и игрок синей команды Ванкувера Куинн Хьюз (32-е место), занявшие соответственно первое и второе место в голосовании за Calder Trophy в прошлом сезоне.
Список экс-мужчин, выпавших из списка в этом сезоне, особенно выделяется — начиная с защитника Лос-Анджелеса Дрю Даути, который занимал 5-е место в течение 10-летнего пробега в списке 50 лучших.
Защитник «Сан-Хосе» Эрик Карлссон и левый нападающий «Далласа» Джейми Бенн завершили свою восьмилетнюю серию, когда топ-50 игроков подошли к концу.
Ознакомьтесь с полным списком 50 лучших игроков на 2020–2021 годы ниже вместе со списком их рейтингов на 2019–2020 годы. Также включены статистические данные, включая сыгранные игры, голы, передачи, очки, среднее количество голов, процент сейвов и локауты.
1. Коннор МакДэвид, Эдм | С | 1 | 1 | 64 | 34 | 63 | 97 |
2.Натан Маккиннон, Col | С | 4 | 2 | 69 | 35 | 58 | 93 |
3. Леон Драйзайтль, Эдм | С | 11 | 3 | 71 | 43 | 67 | 110 |
4. Auston Matthews, Tor | С | 6 | 4 | 70 | 47 | 33 | 80 |
5.Виктор Хедман, TB | D | 9 | 5 | 66 | 11 | 44 | 55 |
6. Артемий Панарин, NYR | LW | 21 | 6 | 69 | 32 | 63 | 95 |
7. Сидни Кросби, Пит | С | 2 | 7 | 41 | 16 | 31 | 47 |
8.Джек Эйхель, Buf | С | 29 | 8 | 68 | 36 | 42 | 78 |
9. Давид Пастрнак, Bos | RW | 25 | 9 | 70 | 48 | 47 | 95 |
10. Брайден-Пойнт, ТБ | С | 24 | 10 | 66 | 25 | 39 | 64 |
11. Роман Джози, Nsh | D | 41 | 11 | 69 | 16 | 49 | 65 |
12. Овечкин Алексей, Wsh | LW | 7 | 12 | 68 | 48 | 19 | 67 |
13. Патрик Кейн, Чи | RW | 5 | 13 | 70 | 33 | 51 | 84 |
14.Элиас Петтерссон, Ван | С | 37 | 14 | 68 | 27 | 39 | 66 |
15. Коннор Хеллебайк, Wpg | G | – | 15 | 58 | 2,57 | .922 | 6 |
16.Марк Шайфеле, Wpg | С | 17 | 16 | 71 | 29 | 44 | 73 |
17. Андрей Василевский, ТБ | G | 20 | 17 | 52 | 2,57 | .917 | 3 |
18. Брэд Маршанд, Bos | LW | 8 | 18 | 70 | 28 | 59 | 87 |
19. Евгений Малкин, Яма | С | 18 | 19 | 55 | 35 | 49 | 74 |
20. Митч Марнер, Тор | RW | 15 | 20 | 59 | 16 | 51 | 67 |
21. Mika Zibanejad, NYR | С | – | 21 | 57 | 41 | 34 | 75 |
22.Кале-Макар, Col | D | – | 22 | 57 | 12 | 38 | 50 |
23. Себастьян Ахо, Автомобиль | С | 33 | 23 | 68 | 38 | 28 | 66 |
24. Александр Барков, Флорида | С | 10 | 24 | 66 | 20 | 42 | 62 |
25.Матвей Ткачук, Cgy | LW | 46 | 25 | 69 | 23 | 38 | 61 |
26. Jonathan Huberdeau, Fla | LW | 42 | 26 | 69 | 23 | 55 | 78 |
27. Джон Карлсон, Wsh | D | 45 | 27 | 69 | 15 | 60 | 75 |
28. Алекс Пьетранджело, VGK | D | 43 | 28 | 70 | 16 | 36 | 52 |
29. Mikko Rantanen, Col | RW | 23 | 29 | 42 | 19 | 22 | 41 |
30.Патрис Бержерон, Bos | С | 14 | 30 | 61 | 31 | 25 | 56 |
31. Марк Стоун, ВГК | RW | 27 | 31 | 65 | 21 | 42 | 63 |
32. Куинн Хьюз, фургон | D | – | 32 | 68 | 8 | 45 | 53 |
33.Райан О’Рейли, StL | С | 31 | 33 | 71 | 12 | 49 | 61 |
34. Мэтью Барзал, NYI | С | 50 | 34 | 68 | 19 | 41 | 60 |
35. Сет Джонс, Clb | D | 30 | 35 | 56 | 6 | 24 | 30 |
36.Кайл Коннор, Wpg | LW | – | 36 | 71 | 38 | 35 | 73 |
37. Кэри Прайс, Mtl | G | 34 | 37 | 58 | 2,79 | .909 | 4 |
38. John Tavares, Tor | С | 12 | 38 | 63 | 26 | 34 | 60 |
39. Миро Хейсканен, Дал | D | – | 39 | 68 | 8 | 27 | 35 |
40. Стивен Стамкос, TB | С | 19 | 40 | 57 | 29 | 37 | 66 |
41. Андрей Свечников, Автомобиль | LW | – | 41 | 68 | 24 | 37 | 61 |
42.Шон Кутюрье, Пхи | С | – | 42 | 69 | 22 | 37 | 59 |
43. J.T. Миллер, Ван | LW | – | 43 | 69 | 27 | 45 | 72 |
44. Зак Веренски, Clb | D | – | 44 | 63 | 20 | 21 | 41 |
45.Блейк Уиллер, Wpg | RW | 32 | 45 | 71 | 22 | 43 | 65 |
46. Патрик Лайн, Wpg | RW | – | 46 | 68 | 28 | 35 | 63 |
47. Дуги Гамильтон, Автомобиль | D | – | 47 | 47 | 14 | 26 | 40 |
48.Тейлор Холл, Buf | LW | 22 | 48 | 65 | 16 | 36 | 52 |
49. Джонни Годро, Cgy | LW | 16 | 49 | 70 | 18 | 40 | 58 |
50. Tuukka Rask, Bos | G | – | 50 | 41 | 2.12 | . 929 | 5 |
TFC trade GK Irwin, приобретение MF DeLeon
Toronto FC принял разностороннего ветерана Ника ДеЛеона и отправил в пятницу запасного голкипера Клинта Ирвина.
28-летний ДеЛеон, сыгравший 180 матчей в регулярном сезоне за последние семь сезонов, был одним из трех игроков, взятых на первом этапе драфта MLS Re-Entry Draft 2018.
Ирвин был продан в Колорадо, откуда он прибыл в сделку в январе 2016 года, отдельной транзакцией в обмен на выбор во втором раунде (39-е место в общем зачете) в MLS SuperDraft 2019 года.
ДеЛеон дает опыт и глубину, учитывая, что он может играть как в полузащите, так и в защите. Совсем недавно он провел время на правом фланге.
«Ник — ветеран, имеющий опыт как атакующего нападающего, так и защитника», — говорится в заявлении гроссмейстера Торонто Тим Безбатченко. «Его универсальность будет долгожданным дополнением к нашему клубу».
ДеЛеон, который заработал 275000 долларов США в 2018 году, стал финалистом новичка года после того, как занял седьмое место в общем зачете в MLS SuperDraft 2012 года.Он провел 202 матча во всех соревнованиях за «Ди Си Юнайтед», забив 19 голов и 19 результативных передач.
В своем сообщении в социальной сети ДеЛеон поблагодарил Торонто за то, что он пригласил его на борт.
«С нетерпением жду возможности извлечь из этого максимум пользы. Это будет захватывающая глава для семьи ДеЛеон», — написал он.
ДеЛеон оставляет «ДК Юнайтед» восьмым в клубной книге рекордов по количеству начатых игр (161), сыгранных (180), сыгранных минут (14 180 минут) и седьмого места по количеству бросков (224).
«Ник был профессиональным модельным агентом Д.С. Юнайтед на протяжении всего своего пребывания в клубе, — сказал генеральный директор DC United Дэйв Каспер. — Он отдавал все, что у него было, для своих товарищей по игрокам, тренерам и болельщикам каждый раз, когда он выходил на поле, чтобы представлять нас ».
29-летний Ирвин не фигурировал в планах Торонто. В ноябре клуб объявил, что не реализует свой контрактный вариант.
Ирвин в конце концов потерял свою стартовую работу из-за Алекса Боно в сезоне 2017 г. зарплата в размере 221300 долларов в 2018 году стала расходной.
«Сделка позволяет нам привлечь актив, а не потерять Клинта в процессе повторного входа, поскольку мы продолжаем формировать наш состав на сезон 2019 года», — сказал Безбатченко.
Ирвин, который в этом сезоне стартовал в семи играх лиги, провел 49 матчей за всю карьеру во всех соревнованиях за TFC и установил рекорд 18–16–13 при 16 чистых матчах. Женившись в межсезонье, Ирвин был одним из представителей игроков Торонто и входил в исполнительный совет Ассоциации игроков MLS.
Торонто по-прежнему ищет запасного вратаря, который присоединится к Боно и Калебу Паттерсон-Сьюэллу, который был номером один в клубе.3 в этом сезоне.
Ирвин будет подстраховывать Тима Ховарда из Колорадо, который недавно отправил в Ванкувер вратаря Зака МакМата в обмен на полузащитника Николаса Мескиду и 100 000 долларов целевых средств.
«Рапидс» также забрали бывшего вратаря резерва «Нью-Йорк Сити» Андре Ролза на драфте.
Защитник Донни Тоя отправился в Реал Солт Лейк. Тоя, бывший доморощенный игрок RSL, также играл за Chivas USA, Montreal Impact и Orlando City.
Принимая игроков на этапе 1 драфта, клубы должны использовать свои варианты контрактов.
Следите за @NeilMDavidson в Twitter
Фундамент для домов и построек
ПУЭ ВП ПРОФДОМ осуществляет строительство ленточного фундамента.
Фундаментная лента представляет собой бетонную полосу, проходящую по периметру здания и повторяющую его контуры. Проектирование, расчет, устройство ленточных фундаментов регламентируется нормами ТСН 29-85, ТСН МФ-97МО.
ОБЪЕМ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ BAND FOUNDATION
Ленточный фундамент — это универсальная основа.Чаще всего их применяют при возведении малоэтажных домов с железобетонными плитами с перекрытиями, тяжелых стен из кирпича, камня, бетона. Устройство ленточных фундаментов необходимо для строительства домов с погребами, подземными гаражами, цокольными этажами. Под деревянный дом желательно строить ленточный фундамент при опасности деформации основания на подзынистых грунтах. Для увеличения жесткости стен при возведении ленточного фундамента под деревянный дом фундамент дополнительно укрепляют сплошными армированными поясами.
ВИДЫ ФУНДАМЕНТОВ
Сборные. Их устанавливают из нескольких железобетонных или бетонных блоков. Главное преимущество — высокая скорость и простота установки.
Монолитный. Изготовлены из бетона с помощью опалубки. Внизу конструкции размещается арматура и теплоизоляция. Монолитная фундаментная лента более трудоемка в сборке, чем сборная, но отличается высокой надежностью и долговечностью.
ЭТАПЫ СТРОИТЕЛЬСТВА ФУНДАМЕНТОВ
- Подготовительные работы.Возведение фундамента начинается с разметки площадки, рытья траншей. Глубина закладки рассчитывается в соответствии с типом несущих конструкций: неглубокие, глубоко заглубленные. Толщина ленточного фундамента зависит от материала, величины нагрузки на фундамент, толщины стен.
- Армирование. Для стандартного строительства на слабопоношенных грунтах используется арматура с разным сечением в зависимости от функциональной нагрузки.При возведении оснований на сильно бороздчатых грунтах применяется продольная и поперечная арматура по ГОСТ 5781-82, ГОСТ 6727-80.
- Установка опалубки. На этом этапе доски из обрезных досок или ламинированной фанеры соединяются в сплошной короб, укрепляются распорными штифтами, брусками, для надежности засыпают грунт.
- Заливка бетона. Заливка осуществляется по желобам, затем бетон вибрирует и укрывается от солнца, бетон набирает полную прочность за 28 дней.
Более подробную информацию о строительстве подвала деревянного дома, здания из кирпича, камня, бетона Вы можете получить у наших специалистов по номерам, указанным на сайте.
ПУЭ ВП ПРОФДОМ предлагает проектирование, расчет и строительство плитного фундамента из безопасных, надежных, современных материалов в соответствии со СНиП 2.02.01-83, ТСН 29-85, ТСН МФ-97 МО.
Плита фундаментная сплошная
РЕКОМЕНДАЦИИ ПО СТРОИТЕЛЬСТВУ ПЛИТНОГО ФУНДАМЕНТА
Плитовый фундамент относится к самым надежным конструкциям, возводимым под всю площадь здания.Это сплошная или решетчатая плита из монолитного железобетона с жестким армированием по всей опорной поверхности. Фундаментная плита отличается повышенной устойчивостью к нагрузкам в весенне-осенний период, когда грунт подвергается постоянному промерзанию ночью и оттаиванию днем. Возведение плитного фундамента рекомендуется проводить на проблемных грунтах, просадках и вздутиях, а также при высоком уровне грунтовых вод. Плитный фундамент отлично защищает подвалы от влаги, его водонепроницаемость при правильной установке гидроизоляции достигает 100%.
СТРОИТЕЛЬСТВО ПЛИТНОГО ФУНДАМЕНТА
Работа начинается с рытья котлована, затем его утрамбовывают, на дно укладывают слой песка и щебня. В строительство фундамента входит укладка гидроизоляционного материала, на который монтируется арматура. Затем в яму закачивают бетон. На полученной плите возводится монолитный ленточный фундамент под несущие стены здания. Впоследствии плитный фундамент можно использовать как цокольный этаж.
СТОИМОСТЬ УЧАСТКА ФУНДАМЕНТА
Цена на плитный фундамент достаточно высока, это связано со значительными затратами на проведение масштабных земляных работ, стоимостью бетона и арматуры. Часто дизайнеры для удешевления строительных работ предлагают смонтировать ленточный фундамент и отдельно сделать пол в подвале. Однако такая конструкция не обеспечивает надежной гидроизоляции и подвержена просадкам. Вероятно, предварительный расчет покажет, что такой вариант финансово более выгоден, но в будущем проблемы неизбежны.Поэтому, если для изучения участка рекомендуется плитный фундамент, расчет грунтов показывает, что грунтовые воды слишком близко, то не экономьте. Сделайте правильный выбор, цена ошибки слишком высока. Фундаментная плита относится к надежным и прочным конструкциям. Стоимость плитного фундамента в ПУЭ ВП ПРОФДОМ рассчитывается индивидуально с учетом характеристик грунта, масштаба проекта и других дополнительных факторов.
Чтобы заказать расчет плитного фундамента, заключить договор о сотрудничестве и получить дополнительную информацию по цене и конструкции, Вы можете позвонить по телефону, указанному в разделе «Контакты».
ПУЭ ВП ПРОФДОМ осуществляет устройство свайного фундамента с ростверком. Компания руководствуется СНиП 2.02.01-83, ТСН 29-85, ТСН МФ-97. Гарантийный срок на все виды работ, связанных с возведением фундамента, составляет 7 лет.
РЕКОМЕНДАЦИИ ПО СТРОИТЕЛЬСТВУ КВАДРАТНОГО ФУНДАМЕНТА ПРИРОСТА
Свайный фундамент с ростверком рекомендуется применять, если дом строится на слабом грунте, когда значительная нагрузка от здания должна передаваться на более плотные слои, лежащие на глубине.На песчаных или слабо пятнистых почвах рекомендуется возводить свайный фундамент с ростверком. Предварительное обследование участка, предназначенного для строительства дома, позволяет выбрать наиболее оптимальный тип фундамента в каждом конкретном случае.
ТЕХНОЛОГИИ СТРОИТЕЛЬСТВА СВАЙНОГО ФУНДАМЕНТА С ПРИРОСТОМ
Свайный фундамент с ростверком состоит из отдельных свай, перекрытых железобетонной или бетонной плитой (балкой). Ростверк объединяет верхние части свай при заливке и служит опорой для возводимых элементов дома.Всего фундаментов:
- Сборные конструкции;
- Сборно-монолитный;
- Монолит.
Ростверк может быть высоким (передача нагрузки на сваи) или низким, расположенным ниже поверхности земли (передающим давление на основание). Для обеспечения высокой изгибной жесткости фундамента деревянных или панельных домов высота ростверка должна быть от 40 до 60 сантиметров. Ширина ростверка свайного фундамента определяется исходя из конструкции стен и первого покрытия дома.При строительстве каменного дома высота ростверка составляет 20-30 сантиметров, а его ширина должна совпадать с толщиной стен.
ПРЕИМУЩЕСТВА ПИЛОТНОГО ФОНДА ПРИ РОСТА
Ростверковая часть свайного фундамента, расположенная над поверхностью земли, позволяет снизить расход бетона, необходимого для заливки, арматуры. Фундамент значительно приподнимает стены дома над землей. Минимальный контакт свайного фундамента с грунтом обеспечивает снижение тепловых потерь здания в несколько раз.Свайный фундамент с армирующим каркасом значительно снижает уровень вибрации, передаваемой от близко расположенных автомобильных или железных дорог. Свайный фундамент дает меньшую усадку, он более экономичен и трудоемок, позволяет значительно сократить объем земляных работ при строительстве.
Дополнительную информацию по устройству свайного фундамента с ростверком, заключению договора о сотрудничестве можно получить по телефону + 37529-606-77-11
.
ПУЭ ВП ПРОФДОМ осуществляет строительство цокольного и цокольного этажей, руководствуясь СНиП 2.02.01-83 «Основания зданий и сооружений», СНиП 31-02 «Дома жилые многоквартирные», ТСН 29-85, ТСН МФ-97. Гарантийный срок на построенные цоколь и цоколь в нашей компании составляет 5 лет.
ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ РАБОТЫ
Для того, чтобы начать строительство цокольного этажа, нам понадобится проект дома, в котором также отображается проект цокольного этажа. Если у вас нет проекта цокольного этажа, наш дизайнер спроектирует дом вашей мечты по проекту цокольного дома.Строительство цокольного этажа или цоколя начинается с инженерной оценки сложности гидрогеологических условий на земельном участке. Что определяется на основании инженерно-геологических изысканий, где указывается тип грунта, раскрываются его свойства, глубина промерзания, расположение водоносных горизонтов, уровень паводка и грунтовых вод. На основании полученных данных составляется проект будущего цоколя или цоколя, рассчитывается стоимость будущих работ, проект и смета согласовываются с заказчиком.
ТЕХНОЛОГИИ СТРОИТЕЛЬСТВА ПЕРВОГО ЭТАЖА, ПОГРЕБА
После подписания договора ЧУП ВП ПРОФДОМ переходит к строительным работам по возведению цокольного этажа. Начинается строительство подвала с разметкой, где к участку пристраивается цоколь подвала. Далее при строительстве фундамента выкапывается котлован. Его размеры должны быть больше уровня пола цокольного этажа. Чтобы можно было установить опалубку стен подвала, котлован должен быть шире плиты основания подвала на одну опорную плиту с каждой стороны.Грунт на дне котлована утрамбовывается, оборудуется песчано-гравийная подушка. Сверху укладывается бетонная подготовка 50-80мм, на которую наносится гидроизоляция. Монтируется арматурный каркас из двух решеток с шагом 200 мм, после чего эта конструкция заливается бетоном, это фундаментная плита. По которым в дальнейшем ведется возведение стен будущего подвала. Стены могут быть выполнены из бетонных фундаментных блоков или монолитного бетона на арматурном каркасе.
Строительство цокольного этажа завершается устройством перекрытий из железобетонных плит, обслуживающих как пол первого этажа здания, а затем работами по организации вентиляции и гидроизоляции помещения. Строительство цокольного этажа предполагает работы по устройству гидроизоляции цоколя. Наша компания использует в строительстве только надежные современные материалы. Чтобы грунтовые воды не попадали на первый этаж, по его периметру делают шторку, устанавливают желоба и водосточные ворота, отводящие воду в канализацию.При устройстве подвала правильно оборудованная гидроизоляция обеспечивает 100% защиту стен и потолка. В результате в подвале поддерживается оптимальный уровень влажности.
Для получения дополнительной информации о строительстве цоколя и цокольного этажа в ППУП ВП ПРОФДОМ, для заказа предварительных исследований на участке с выездом нашего специалиста на объект, Вы можете позвонить по телефону + 37529-606-77-11
Spring 2016 Опросы Numeris: Bell Media остается ведущей радиовещательной компанией на англоязычном рынке Монреаля благодаря Virgin Radio 96, CHOM 97 7, CJAD 800 и TSN Radio 690
МОНТРЕАЛЬ (9 июня 2016 г.) — Данные PPM за весну 2016 г. Опубликованные сегодня исследования Numeris подтверждают, что Bell Media остается ведущей радиовещательной компанией на англоязычном рынке Монреаля.Через свои станции Virgin Radio 96 , CHOM 97 7 , CJAD 800 и TSN Radio 690 Bell Media контролирует в общей сложности 76 коммерческих акций среди взрослых в возрасте от 25 до 54 лет. 1 Более того, добавив доли рынка, контролируемые французскими радиостанциями ÉNERGIE Montréal 94,3 и 107,3 Rouge fm , Bell Media достигает в общей сложности 4,1 миллиона слушателей в неделю. 2 Результаты не только подчеркивают популярность шести станций Bell Media в Монреале среди слушателей, но и подтверждают их неоспоримую привлекательность среди местных и национальных рекламодателей. Англоязычный рынок Монреаля
Этой весной Virgin Radio 96 остается самой популярной станцией среди взрослых в возрасте от 25 до 54 лет в англоязычном сегменте Монреаля с 26,6 рекламными акциями. 1 Он по-прежнему остается самым популярным среди женщин в возрасте от 25 до 54 лет, имея 29,3 коммерческих акций. 1 Имея в общей сложности 2 072 000 слушателей, Virgin Radio 96 также занимает первое место по охвату среди англоязычных станций города. 2 CHOM 97 7 поднялся на второе место среди самых популярных станций среди взрослых в возрасте от 25 до 54 лет с 24,7 коммерческими акциями (на 10% больше, чем прошлой зимой) 1 , достигнув в общей сложности 1 615 000 слушателей. 2 Он также наиболее популярен среди своей целевой аудитории, а именно мужчин в возрасте от 25 до 54 лет, с 30,8 коммерческими акциями. 1 Действительно, все программы выходят на CHOM 97 7 по будням с 5:30 до 19:00. занимает первое место среди англоговорящих мужчин в возрасте 25-54 лет по результатам второго опроса подряд. 3
Между тем, CJAD 800 остается самой популярной станцией с аудиторией от 2 лет и старше с 34,2 коммерческими акциями. 1 Этой весной у станции 486 000 слушателей, 2 обеспечили 20,3 коммерческих акций среди взрослых в возрасте от 25 до 54 лет на англоязычном рынке Монреаля. Рейтинг 1 CJAD 800 постоянно растет, станция завоевала 4 доли коммерческого рынка среди взрослых в возрасте от 25 до 54 лет по сравнению с тем же периодом прошлого года! 1 Более того, с 25 акциями, ANDREW CARTER MORNING SHOW царит как самое популярное утреннее шоу среди англоязычных слушателей в возрасте от 25 до 54 лет. 3
Наконец, спортивная станция TSN Radio 690 может похвастаться в общей сложности 185 000 слушателей и 4,4 рекламными акциями среди взрослых в возрасте от 25 до 54 лет. 1 Французский рынок Монреаля
Среди франкоязычных станций Bell Media, ÉNERGIE Montréal 94,3 этой весной имеет в общей сложности 1 443 000 слушателей 2 , а также 11,5 коммерческих акций среди взрослых в возрасте от 25 до 54 лет. 1 Программа ÉRIC ET LES FANTASTIQUES (выход в эфир по будням с 4 до 6 часов).м) выложил отличный результат. Действительно, помимо растущей известности в Монреале, с момента запуска прошлой осенью он занял первое место в своем временном интервале среди взрослых в возрасте от 25 до 54 лет по всей провинции! 4
Наконец, 107,3 Rouge FM может похвастаться 1 575 000 слушателей 2 этой весной и 16,3 рекламными акциями среди взрослых в возрасте от 25 до 54 лет, что на 4% больше, чем прошлой зимой. 1 Станция также сообщила об увеличении на 4% среди женщин в возрасте от 25 до 54 лет, с 19,2 коммерческими акциями. 1 Кроме того, вчера Rouge FM объявила, что ее новое вечернее шоу с 15 августа будет вести Мари-Клод Барретт вместе с со-ведущими Брижит Лафлер и Карин Шампань.Обследования весной 2016 года Numeris проводились с 29 февраля по 29 мая 2016 года . Для получения дополнительной информации об этих результатах посетите sondage.bellmediaradio.ca .
Источники: Numeris, 29 февраля — 29 мая 2016 г.
- A25-54 / F25-54 / M25-54 / T2 +, Пн-Вс, 2a-2a, CKMF, CITE, CJFM, CHOM, CJAD, CKGM, Montréal Franco / Montréal Anglo, доли коммерческого рынка (на основе общего прослушивания время торговых станций рынка).
- Все 2+, пн-вс, 2a-2a, все радиостанции Bell Media вместе или по отдельности, в зависимости от обстоятельств (CKMF, CITE, CJFM, CHOM, CJAD, CKGM), общий объем, недельный охват.
- M25-54 / A25-54, временной интервал передачи, CHOM / CJAD, Montréal Anglo, доля рейтингов.
- (4) A25-54, M-F 4p-6p, станции сети ÉNERGIE (кроме Квебека), доли рынка (в пределах их центральной зоны).
Адвокатское бюро Фрэнка Р. Круза напоминает инвесторам о коллективных исках от имени акционеров
ЛОС-АНДЖЕЛЕС, 22 марта 2021 г. (GLOBE NEWSWIRE) — Адвокатское бюро Фрэнка Р. Круза напоминает инвесторам о возбуждении коллективных исков подана от имени акционеров следующих публичных компаний.Инвесторы должны до указанных ниже сроков подать ходатайство ведущего истца.
Инвесторам, потерпевшим убытки по своим инвестициям, рекомендуется обращаться в Адвокатское бюро Фрэнка Р. Круза, чтобы обсудить свои законные права в этих коллективных исках, по телефону 310-914-5007 или по электронной почте [email protected].
iRhythm Technologies, Inc. (NASDAQ: IRTC)
Срок действия: 4 августа 2020 г. — 28 января 2021 г. Срок подачи истца
: 2 апреля 2021 г.
В поданной жалобе утверждается, что на протяжении всего периода обучения Ответчики сделали существенно ложные и / или вводящие в заблуждение заявления, а также не раскрыли существенные неблагоприятные факты о бизнесе, деятельности и перспективах Компании.В частности, Ответчики не сообщили инвесторам, что: (1) бизнес iRhythm пострадает в результате нормотворчества CMS; (2) ставки возмещения фактически резко упадут; (3) отсутствие национальных цен в правилах и тарифах CMS может вызвать неопределенность и слабость в бизнесе Компании; и (4) в результате заявления Ответчиков о его бизнесе, операциях и перспективах были существенно ложными и вводящими в заблуждение и / или не имели разумной основы во все относящиеся к делу моменты.
Tyson Foods, Inc. (NYSE: TSN)
Период рассмотрения дела: 13 марта 2020 г. — 15 декабря 2020 г. и / или вводящие в заблуждение заявления, а также не раскрытие существенных неблагоприятных фактов о бизнесе, деятельности и перспективах Компании. В частности, Ответчики не раскрыли инвесторам, что: (1) Тайсон знал или должен был знать, что очень заразный коронавирус распространяется по всему миру; (2) у Tyson на самом деле не было достаточных протоколов безопасности для защиты своих сотрудников на своих объектах; (3) в результате сотрудники Tyson заразились коронавирусом и распространили его внутри помещений; (4) в результате вышеизложенного Тайсон столкнется с негативным воздействием на его производство, включая полную остановку некоторых предприятий; (5) из-за неспособности защитить своих сотрудников Тайсон понесет финансовый ущерб, связанный со снижением производства; и (6) в результате положительные утверждения Ответчиков о бизнесе, операциях и перспективах Компании вводили в заблуждение и / или не имели разумной основы в любое время.
История продолжается
Clover Health Investments, Corp. (NASDAQ: CLOV, CLOVW)
Срок действия: 6 октября 2020 г. — 4 февраля 2021 г. Срок подачи истца
: 6 апреля 2021 г.
Жалоба подана утверждает, что на протяжении всего Периода Класса Ответчики делали существенно ложные и / или вводящие в заблуждение заявления, а также не раскрывали существенные неблагоприятные факты о бизнесе, деятельности и перспективах Компании. В частности, Ответчики не сообщили инвесторам, что: (1) платформа Clover Assistant компании активно расследовалась Министерством юстиции по меньшей мере по 12 вопросам, начиная от откатов и заканчивая маркетинговой практикой и нераскрытыми сделками с третьими сторонами; (2) расследование Министерства юстиции представляет собой существенный риск для Компании, поскольку она получает большую часть своих доходов от Medicare; (3) Продажи Clover были обусловлены крупной сделкой с нераскрытой связью и вводящим в заблуждение маркетингом, нацеленным на пожилых людей, а не его якобы «лучшей в своем классе» технологией; (4) значительная часть продаж Clover была связана с нераскрытыми отношениями между Clover и внешней брокерской фирмой, контролируемой главой отдела продаж Clover; и (5) в результате заявления Ответчиков о его бизнесе, операциях и перспективах были существенно ложными и вводящими в заблуждение и / или не имели разумной основы в любое время.
Следите за обновлениями в Twitter: twitter.com/FRC_LAW.
Чтобы быть участником этих групповых исков, вам не нужно предпринимать никаких действий в это время; вы можете нанять адвоката по своему выбору или не предпринимать никаких действий и оставаться отсутствующим участником группового иска. Если вы хотите узнать больше об этих групповых исках или если у вас есть какие-либо вопросы относительно этого объявления или ваших прав или интересов в отношении этих вопросов, пожалуйста, свяжитесь с Фрэнком Р. Крузом из Адвокатского бюро Фрэнка Р. Круза, 1999 Avenue of the Stars, Suite 1100, Los Angeles, California
Этот пресс-релиз может рассматриваться как реклама адвоката в некоторых юрисдикциях в соответствии с применимым законодательством и этическими правилами.
Контакты
Адвокатское бюро Фрэнка Р. Круза, Лос-Анджелес
Фрэнк Р. Круз, 310-914-5007
[email protected]
www.frankcruzlaw.com
Тоосенданин демонстрирует многообещающее противоопухолевое действие путем нацеливания на STAT3
Материалы
Очищенный тоосенданин (MF: C 30 H 38 O 11 , MW: 574.62, чистота> 98%) был приобретен у Shanghai Yuan Ye Biotechnology Co. Ltd (Шанхай, Китай). Все реагенты для клеточных культур были приобретены у Invitrogen Life Technologies (Карлсбад, Калифорния, США). Диметилсульфоксид (ДМСО) был получен от Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури, США). Матригель был приобретен у BD Bioscience (Пасадена, Калифорния, США). p-STAT3 (Y705) (# 9145), p-STAT3 (S705) (# 94994), STAT3 (# 9139), Survivin (# 2808 S), Bcl-2 (# 15071), SOCS3 (# 2923), PTEN (# 9188), PARP (# 9532), расщепленный PARP (# 5625), N-кадгерин (# 14215), Zeb1 (# 3396) и E-кадгерин (# 14472) антитела были приобретены у Cell Signaling Technology Inc.(Дэнверс, Массачусетс, США). Антитела SHP-1 (ab32559), SHP-2 (ab32083) и фибронектин (ab2413) были приобретены у Abcam (Гонконг, Китай). Антитело актина (A1978) было приобретено у Sigma-Aldrich (Sigma-Aldrich, Inc., Шанхай, Китай).
Культура клеток
Клеточные линии 143B (клетки остеосаркомы человека), HOS (клетки остеосаркомы человека), MG63 (клетки остеосаркомы человека), HCT116 (клетки рака толстой кишки человека), SGC7901 (клетки карциномы желудка человека), SKOV3 (рак яичников человека) клетка), MDA-MB231 (клетка рака груди человека), DU145 (клетка рака предстательной железы человека), HeLa (клетка рака шейки матки человека) и SW1990 (клетка рака поджелудочной железы человека) были приобретены в ATCC (Манассас, Вирджиния, США).Клеточная линия MG63.2 была создана путем серийного пассирования родительских клеток MG63. 37 Клеточная линия остеосаркомы LM8 мыши и ее родительская клеточная линия Dunn с низким метастатическим потенциалом были первоначально созданы профессором Тацуей Асаи (отделение ортопедической хирургии, Осакский медицинский центр рака и сердечно-сосудистых заболеваний, Осака, Япония). Все клеточные линии поддерживали в среде DMEM с добавлением 10% FBS плюс 1% пенициллин / стрептомицин. HUVEC (ScienCell Research Laboratories, Сан-Диего, Калифорния, США) культивировали в полном ECM (Sciencell) с добавлением 5% FBS.Клетки hFOB1.19 были приобретены и культивированы в среде DMEM / F12 (1: 1) с 10% FBS и 300 нг / мл G418. Клетки поддерживали при 37 ° C в увлажненном инкубаторе с 5% CO2. Периодически контролировали заражение микоплазмами.
Анализ репортерной люциферазы STAT3
Для обнаружения активации STAT3 использовали репортерную плазмиду люциферазы STAT3 (pGMSTAT3-Luc), полученную от Shanghai Yi Sheng Biotechnology Co. Ltd., и анализ проводили, как описано ранее. 3 Вкратце, клетки котрансфицировали pGMSTAT3-Luc и pRL-SV40 (плазмида, кодирующая люциферазу Renilla) с использованием Lipofectamine 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA).Через 24 часа клетки обрабатывали тестируемыми соединениями в течение 24 часов. Люциферазную активность оценивали с помощью системы двойного люциферазного репортерного анализа (Promega, Мэдисон, Висконсин, США) с использованием люминометра (Thermo Scientific, Уолтем, Массачусетс, США).
Вестерн-блоттинг
Вестерн-блот-анализ выполняли, как описано ранее. 38 Белки экстрагировали в буфере для лизиса клеток RIPA, содержащем ингибиторы протеаз и фосфатаз. Иммуноблоттинг проводили с указанными антителами.
Иммунофлуоресцентное окрашивание
Клетки культивировали и обрабатывали на покровном стекле и фиксировали 4% параформальдегидом с последующей 5-минутной пермеабилизацией 0,1% Triton X-100. После инкубации с указанными антителами в течение ночи при 4 ° C клетки инкубировали с соответствующими вторичными антителами в течение 1 ч при комнатной температуре, а затем окрашивали DAPI и визуализировали с помощью конфокального микроскопа (Leica).
Анализ сдвига электрофоретической подвижности (EMSA)
EMSA выполняли с использованием набора Odyssey Infrared STAT3 EMSA Kit (LI-COR Biosciences, Lincoln, NE, USA) в соответствии с инструкциями производителя. 39 STAT3 IRDye 700 меченными инфракрасным красителем олигонуклеотидами были: 5′-IndexTermGATCCTTCTGGGAATTCCTAGATC-3 ‘и 3′-IndexTermCTAGGAAGACCCTTAAGGATCTAG-5’ (жирным шрифтом обозначены сайты связывания STAT3).
RT-PCR
Общую РНК экстрагировали с использованием реагента TRIzol (Invitrogen). Образцы РНК (1 мкг) подвергали ОТ-ПЦР с использованием набора TaKaRa RT-PCR (Takara, Shiga, Japan). Затем продукты ПЦР детектировали электрофорезом в 1% агарозных гелях и визуализировали с помощью GoldView. Используемые праймеры перечислены в дополнительной таблице 1.
Анализ иммунопреципитации хроматина (ChIP)
Анализ ChIP выполняли, как описано ранее. 3 Вкратце, после обработки клетки 143B обрабатывали 1% формальдегидом в течение 10 мин для сшивания хроматина и белка. Образцы хроматина и белка иммунопреципитировали антителом STAT3. Затем иммунопреципитаты инкубировали с гранулами агарозы с протеином A / G. После нескольких промывок комплекс белок-ДНК изменился. ДНК очищали с использованием фенол-хлороформа.ДНК анализировали с помощью кПЦР с использованием праймеров, которые были специфичны для областей, охватывающих сайты связывания Stat3 в промоторах BCL-2 , VEGF и SOCS3 .
Экспрессия и очистка STAT3-Sh3 человека
Рекомбинантный слитый белок STAT3-Sh3 человека был экспрессирован в E. coli BL21 (DE3). Обычно BL21 (DE3) трансформировали плазмидой pGEX4T-1-STAT3-Sh3. Когда значение OD достигло примерно 0,6, E. coli переводили в температуру 22 ° C и 0.Добавляли 5 мМ изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозид (IPTG). Растворимый белок получали обработкой ультразвуком и центрифугированием. Белок инкубировали с гранулами глутатион-сефароза (GE), а затем элюировали 20 мМ восстанавливающим раствором глутатиона. Белок дополнительно концентрировали с помощью центрифужной пробирки для ультрафильтрации (Millipore) и определяли концентрацию белка. Белок окрашивали кумасси бриллиантовым синим.
Анализ поверхностного плазмонного резонанса (SPR)
Этот анализ был проведен с помощью прибора Biacore T200 (GE Healthcare) с сенсорным чипом CM5 (GE Healthcare).Чтобы захватить STAT3-Sh3 с помощью GST-метки, GST-антитела иммобилизовали в каналах с параллельным потоком сенсорного чипа CM5 с помощью набора для захвата GST (GE Healthcare) и набора для связывания аминов (GE Healthcare). STAT3-Sh3 с тегом GST был захвачен. Для проверки связывания TSN белка STAT3-Sh3 в проточную систему вводили серию концентраций TSN. Эксперименты проводились с буфером PBS, и аналит вводился со скоростью 30 мкл / мин. Время ассоциации 60 с, время диссоциации 30 с.Поскольку TSN растворяли в PBS с 5% ДМСО, для корректировки результатов был проведен анализ коррекции растворителя.
Анализ совместной иммунопреципитации
После обработки клетки 143B собирали с помощью буфера для лизиса клеток NP40. Равное количество белков инкубировали с антителами в течение ночи при 4 ° C. Иммуопреципитаты инкубировали с гранулами агарозы с белком A / G и неспецифические белки смывали промывочным буфером.
Анализ жизнеспособности клеток MTS
Клетки (5 × 10 3 на лунку) высевали в 96-луночные планшеты.Через 48 часов после воздействия TSN добавляли водный раствор One. Были получены значения OD при 490 нм.
Клоногенный анализ опухолевых клеток
Клоногенный анализ клеток проводили, как описано ранее. 3 Опухолевые клетки высевали в 6-луночный планшет. После прикрепления опухолевых клеток добавляли различные концентрации TSN. На 7 день колонии фиксировали и окрашивали 0,1% кристаллическим фиолетовым. Количество колоний подсчитывали вручную.
Анализ апоптоза
Апоптоз измеряли с использованием набора для обнаружения апоптоза (BD Biosciences), как описано ранее. 40
Сбор условной среды и анализ формирования пробирок
Когда плотность клеток (клетки 143B) достигала 90%, среду для роста заменяли бессывороточной средой, содержащей указанные концентрации TSN, и клетки инкубировали в течение 24 часов при 37 ° С. Затем условную среду собирали и хранили при -80 ° C для последующего анализа формирования пробирки. HUVEC (1 × 10 4 ) высевали на Матригель с условной средой. После инкубации в течение 8 часов были сделаны микрофотографии и длина трубчатых структур была определена с помощью Image-Pro Plus 6.0 (Media Cybernetics, Bethesda, MA, США).
Анализ инвазии
Анализ инвазии проводили, как описано ранее. 41 Вкратце, после 12 ч предварительной обработки TSN, всего 5 × 10 4 клеток (для 143B) или 10 × 10 4 клеток (для MG63.2) были засеяны в верхнюю камеру. В обе камеры добавляли разные концентрации TSN. Зараженные клетки окрашивали 0,1% кристаллическим фиолетовым. А количество зараженных ячеек подсчитывали вручную.
Иммуногистохимический анализ (ИГХ)
Анализ ИГХ выполняли, как сообщалось ранее. 40 Срезы (4 мкм) окрашивали указанными антителами. Изображения были получены с помощью микроскопа Leica (Leica, DM4000b).
Трехмерный (3D) анализ сверху
Трехмерный анализ сверху выполняли, как описано ранее. 38 Вкратце, матригель добавляли в 48-луночный планшет. Клетки 143B ресуспендировали в DMEM с 10% матригелем, а также с указанным TSN, а затем высевали на затвердевший матригель.Сверху смесь меняли через день.
Анализ разложения флуоресцентного желатина
Этот анализ выполняли, как сообщалось ранее. 42 Вкратце, клетки предварительно обрабатывали TSN в течение 24 часов, а затем высевали на каждое покровное стекло (предварительно покрытое 0,1% флуоресцеинизотиоциантом (FITC) -желатином (Invitrogen) 1: 9: 0,2% свиного желатина) с различными концентрациями TSN. . Через 12 ч проводили иммунофлуоресцентный анализ. Разложение желатина количественно определяли с помощью Image-Pro Plus 6.0 программное обеспечение.
Модель на животных
Все экспериментальные исследования и исследования по уходу за животными проводились в соответствии с руководящими принципами и одобрением Комитета по исследованию животных Шанхайской больницы общего профиля Медицинской школы Шанхайского университета Цзяо Тонг. Самцов бестимусных голых мышей BALB / c (6-8 недель) и мышей BALB / c (6-8 недель) разводили и содержали в экспериментальном центре на животных в Шанхайской больнице общего профиля.
Для модели ксенотрансплантата остеосаркомы (143B) опухолевые клетки 143B (1 × 10 6 ) суспендировали в стерильном PBS (20 мкл) и вводили в костномозговую полость большеберцовой кости каждой мыши.Через 7 дней три группы ( n = 6 на группу) были случайным образом разделены и получали i.p. введение TSN (1 мг / кг за 2 дня и 2 мг / кг за 2 дня) по сравнению с мышами, которым вводили DMSO (контрольная группа). Через 24 дня все мыши были казнены. Задняя конечность с опухолями и легкими была мелко иссечена для дальнейшего исследования. Вес опухоли и количество узлов метастазов в легких были измерены тремя людьми, у которых нет личных предубеждений в отношении текущего эксперимента. Другой независимый эксперимент на животных ( n = 8 на группу) был проведен, чтобы определить, продлевает ли TSN выживаемость мышей.
Полученная от пациента модель ксенотрансплантата остеосаркомы человека (PDX) на животном была проведена в соответствии с ранее описанными процедурами. 43 Вкратце, семь пар образцов остеосаркомы и соответствующие неопухолевые прилегающие ткани были получены от пациентов, перенесших хирургическое удаление остеосаркомы в Шанхайской больнице общего профиля Шанхайского университета Цзяо Тонг, школы медицины. Свежую опухолевую ткань стерильно разрезали на кусочки размером ~ 3 мм 3 , затем делали s.c. в бок голых мышей. Оставшиеся опухолевые ткани хранили в жидком азоте. Когда опухоли успешно прижились, образцы опухолей были перенесены в третье поколение голых мышей для следующих исследований. На 7 день мышей разделили на три группы ( n = 8) и получили i.p. инъекции TSN (1 мг / кг / 2 дня и 2 мг / кг / 2 дня) по сравнению с мышами, которым вводили DMSO (контрольная группа). Объем опухоли измеряли цифровым штангенциркулем каждую неделю. Объем опухоли определяли по следующей формуле: (длина × ширина 2 ) × 0.52. Через 35 дней все мыши были убиты. Опухоли были удалены и подготовлены для вестерн-блоттинга и иммуногистохимического анализа.
Окрашивание H&E
Мозг, сердце, легкие, почки, печень и селезенка фиксировали в течение ночи и заливали парафином. Срезы окрашивали H&E.
Статистический анализ
Размер выборки был использован для обеспечения адекватной статистической мощности (≥ 80%) в соответствии с формальным расчетом мощности. Данные представлены как среднее ± s.d. Тест Стьюдента t использовали для сравнения двух групп ( P <0,05 считалось статистически значимым), если не указано иное. Все эксперименты проводились не менее трех раз, кроме моделей на животных. Дисперсия на анализ была сходной между группами, статистически сравниваемыми. Никакие точки данных в нашем исследовании не были исключены.
Название сценария
Название сценария
- geninfo Общая информация
- число Число
- лен Длина оправы
- caplen Длина захвата
- отметка времени Время захвата
- кадр Кадр 305: 62 байта по сети (496 бит), 62 байта захвачено (496 бит)
- рама.encap_type Тип инкапсуляции: Ethernet (1)
- frame.time Время прибытия: 6 ноября 2009 г. 05: 59: 38.082307000 Стандартное восточное время
- frame.offset_shift Временной сдвиг для этого пакета: 0,000000000 секунд
- frame.time_epoch Время эпохи: 1257505178.082307000 секунд
- frame.time_delta Разница во времени от предыдущего захваченного кадра: 0,000069000 секунд
- рама.time_delta_displayed Разница во времени относительно предыдущего отображаемого кадра: 0,000069000 секунд
- frame.time_relative Время с момента ссылки или первого кадра: 19,849681000 секунд
- номер кадра Номер кадра: 305
- frame.len Длина кадра: 62 байта (496 бит)
- frame.cap_len Длина захвата: 62 байта (496 бит)
- рамка с маркировкой Рамка с маркировкой: False
- рама.игнорируется Кадр игнорируется: ложь
- frame.protocols Протоколы в кадре: eth: ip: sctp
- eth Ethernet II, Src: DssNetwo_0a: c3 (00: 50: c2: 59: da: c3), Dst: DssNetwo_0a: 3b (00: 50: c2: 59: da: 3b)
- eth.dst Назначение: DssNetwo_0a: 3b (00: 50: c2: 59: da: 3b)
- eth.addr Адрес: DssNetwo_0a: 3b (00: 50: c2: 59: da: 3b)
- эт.LG …. ..0. …. …. …. …. = LG bit: Глобальный уникальный адрес (заводская установка)
- eth.ig …. … 0 …. …. …. …. = IG bit: Индивидуальный адрес (одноадресный)
- eth.src Источник: DssNetwo_0a: c3 (00: 50: c2: 59: da: c3)
- eth.addr Адрес: DssNetwo_0a: c3 (00: 50: c2: 59: da: c3)
- eth.lg …. ..0. …. …. …. …. = LG bit: Глобальный уникальный адрес (заводская установка)
- eth.ig …. … 0 …. …. …. …. = IG bit: Индивидуальный адрес (одноадресный)
- eth.type Тип: IP (0x0800)
- eth.dst Назначение: DssNetwo_0a: 3b (00: 50: c2: 59: da: 3b)
- ip Интернет-протокол версии 4, Src: 172.210.0.1 (172.210.0.1), Dst: 172.210.0.2 (172.210.0.2)
- ip.version Версия: 4
- ip.hdr_len Длина заголовка: 20 байт
- ip.dsfield Поле дифференцированных служб: 0x00 (DSCP 0x00: по умолчанию; ECN: 0x00: Not-ECT (транспорт без поддержки ECN))
- ip.dsfield.dscp 0000 00 .. = Кодовая точка дифференцированных служб: по умолчанию (0x00)
- ip.dsfield.ecn …. ..00 = явное уведомление о перегрузке: Not-ECT (транспорт без поддержки ECN) (0x00)
- ip.len Общая длина: 48
- ip.id Идентификация: 0x88ad (34989)
- ip.flags Флаги: 0x00
- ip.flags.rb 0 … …. = Зарезервированный бит: не установлен
- ip.flags.df .0 .. …. = Не фрагментировать: не задано
- ip.flags.mf ..0. …. = Больше фрагментов: Не установлено
- ip.frag_offset Смещение фрагмента: 0
- ip.ttl Время жизни: 64
- ip.proto Протокол: SCTP (132)
- ip.checksum Контрольная сумма заголовка: 0x97f5 [правильно]
- ip.checksum_good Хорошо: Правда
- ip.checksum_bad Плохо: Ложь
- ip.src Источник: 172.210.0.1 (172.210.0.1)
- ip.addr Адрес источника или назначения: 172.210.0.1 (172.210.0.1)
- ip.src_host Исходный хост: 172.210.0.1
- ip.host Исходный или целевой хост: 172.210.0.1
- ip.dst Назначение: 172.210.0.2 (172.210.0.2)
- ip.addr Адрес источника или назначения: 172.210.0.2 (172.210.0.2)
- ip.dst_host Целевой хост: 172.210.0.2
- ip.host Исходный или целевой хост: 172.210.0.2
- Источник GeoIP: Неизвестно
- Destination GeoIP: Неизвестно
- sctp Протокол передачи управления потоком, порт Src: m3ua (2905), порт Dst: m3ua (2905)
- sctp.srcport Порт источника: 2905
- sctp.dstport Порт назначения: 2905
- sctp.verify_tag Проверочный тег: 0x15fb59e2
- sctp.port Порт: 2905
- sctp.port Порт: 2905
- sctp.checksum Контрольная сумма: 0x9c55c032 (не проверена)
- sctp Блок SACK (совокупный TSN: 368796423, a_rwnd: 4096, пробелы: 0, повторяющиеся TSN: 0)